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外周血单个核细胞中肺炎衣原体的分离、培养及传代
毕业论文
全部作者: | 金前 孙书明 王卫群 余竹元 |
第1作者单位: | 复旦大学附属金山医院呼吸科 |
论文摘要: | 目的 分离并培养肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae, Cpn),并进行传代、扩增。方法 分离血液标本中的外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell, PBMC),用PEG使Cpn-Ag阳性的PBMC裂解释放出Cpn,然后与Hep-2细胞1起离心,继续培养Hep-2细胞。再将Hep-2细胞冻融破碎后,放入到新的Hep-2细胞中进行离心,以完成Cpn的1次传代,然后以同样的方法进行2次传代。分别用微量免疫荧光法(Micro-immunofluorescence, MIF)及PCR法检测Hep-2细胞中的Cpn-Ag和Cpn DNA。结果 MIF法检测Cpn感染后的Hep-2细胞,其胞内Cpn-Ag阳性;MIF法检测1次传代及2次传代的Hep-2细胞,其胞内Cpn-Ag亦均阳性;PCR法检测Cpn DNA阳性。结论 该简化方法可以实现PBMC中Cpn的分离,并实现进1步的培养及传代。 |
关键词: | 肺炎衣原体;外周血单个核细胞;培养;传代 远程下载 论文(免费PDF论文全文) |
发表日期: | 2007年04月27日 |
同行评议: | (暂时没有) |
综合评价: | (暂时没有) |
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