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人肝癌细胞系HepG2中survivin-3鉴定及其真核载体构建
毕业论文
全部作者: | 徐兵 杨来华 |
第1作者单位: | 江苏省丹阳市中医院 |
论文摘要: | 目的:鉴定肝癌细胞系HepG2中survivin异构体(survivin varient,SVV varient)并构建其真核表达载体。方法:提取HepG2细胞总RNA,根据Gen-Bank内survivin 3个异构体核苷酸序列设计3条引物对其进行鉴定;设计含有BamHⅠ和XhoⅠ双酶切位点的SVV-3引物,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增SVV-3完整编码区,扩增产物用BamHI 和XhoI 双酶切后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1 中, 序列测定进行鉴定。结果:HepG2细胞表达SVV-3、1,SVV-3表达尤为丰富。对SVV-3克隆测序,与Gen-Bank报道完全1致。结论:成功鉴定出HepG2表达SVV-3、1,构建了SVV-3真核表达载体,为后续研究提供更明确的目标。 |
关键词: | SVV,真核表达载体,HepG2 远程下载 论文(免费PDF论文全文) |
发表日期: | 2007年11月06日 |
同行评议: | 文章题目简明,准确反映了研究工作的特定内容。摘要4要素明确,重点科学问题与目的、材料和方法和结论相符。采用分子生物学常规方法(逆转录聚合酶链反应),研究了人肝癌细胞系HepG2中survivin-3 鉴定及其真核载体构建。但也存在如下问题:1. HepG2 总RNA 提取及反转录合成HepG2 总cDNA应给出具体引物2.PCR产物长度上存在疑问3.参考文献相对陈旧,使得讨论部分未能和最新研究成果对比,所以讨论部分不够深刻。建议修改后发表 |
综合评价: | |
修改稿: | |
注:同行评议是由特聘的同行专家给出的评审意见,综合评价是综合专家对论文各要素的评议得出的数值,以1至5颗星显示。 |
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