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温通法对S-荷瘤小鼠的抑瘤作用的实验探试究
摘要:目的 研究温通法对小鼠s 肉瘤的抑瘤作用,并初步探讨其抑瘤机制,为其临床应用提供理论依据。方法 建立昆明种小鼠S 肉瘤模型50个。随机分为中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、荷瘤对照组、CTX化疗组,通过对比观测温通法对小鼠体重、瘤重、肝脾重量及小鼠一般状况的影响。结果荷瘤对照组瘤重明显大于各治疗组,与中药低剂量组比较有统计学意义(P<0.05),与其余各组比较有显著统计学意义(P<0.01),中药高剂量组、高剂量组胸腺指数明显高于荷瘤对照组(P<0,05),中药高剂量组、中药高剂量组脾指数高于荷瘤对照组(P<0.05)。结论 中药治疗各组能明显抑制小鼠sⅢ肉瘤的生长,提高荷瘤小鼠机体免疫力,并能改善小鼠的一般状况。
关键词:温通法;s 肉瘤;抑瘤作用;免疫调节;中医肿瘤学;中医肿瘤实验医学
中医认为肿瘤的形成与气滞、痰凝、血瘀等诸多因素有关,但寒邪外侵、阳气亏虚乃为其最为重要的根本原因。《灵枢·百病始生》对肿瘤之成因及其病变过程的论述最为精当:“黄帝日:积之始生,至其已成,奈何?岐伯日:积之始生,得寒乃生,厥乃成积也。”目前,多数医家从热毒人手,每投以寒凉消解之品,然而近年众多医家临床发现很多恶性肿瘤患者具有畏寒乏力,舌淡苔白,脉沉迟无力等阳虚寒凝的临床表现,投以温阳散寒药,每收到较好疗效。鉴此,本次实验确立了以温通法治疗肿瘤的原则,选用温阳的典型代表中药附子、干姜、桂枝,以其合剂的灌服小鼠,通过观测对荷瘤小鼠的抑瘤作用,对免疫器官的影响及小鼠一般状况进行比较,探讨温通法对s 。肉瘤的抑制作用,以期为温通法在恶性肿瘤领域的进一步应用提供新的依据。
1 材料
1.1 动物
昆明种健康小白鼠5O只,雌雄各半,质量18~22g,6~8周龄,由河南省实验动物中心提供。把它们随机分为5组,雌雄随机,荷瘤对照组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、CTX化疗组,每组10只。
1.2 瘤株
腹水型SⅢ小鼠瘤株,由河南省(郑州大学)医药科学研究所提供。
1.3 药物及制备
1.3.1 中药饮片
由河南省中医院中药药房提供,按附子:干姜:桂枝=2:2:1的比例配制。取中药饮片置煎煮容器中,加入相当于生药量5倍的冷水浸泡30min,武火煮沸后文火煮30min,过滤;药渣加冷水继续煎煮,武火煮沸后文火煮20min,过滤;合并两次滤液,60%水浴浓缩,分为低、中、高3个剂量,经计算低剂量组相当于生药材1.30g/ml的药液,中剂量组相当于生药材2.56g/ml的药液,高剂量相当于生药材3.83g/ml的药液,冷却后装入灭菌药瓶,置4~C冰箱保存备用。
1.3.2 注射用环磷酰胺(CTX)
江苏恒瑞医药股份有限公司生产,规格:200mg/支。产品批号:07042021。现配现用。
2 方法
2.1 $18o荷瘤小鼠模型制备
将接种Sl8o第8天的腹水瘤小鼠处死,无菌条件下抽取腹水,用生理盐水配制成约1×10。个/ml的细胞悬液,无菌条件下把5组小白鼠于每只左侧腋下皮下注射0.2ml瘤细胞悬液。
2.2 给药方法
中药组:接种昆明鼠24h后中药组进行灌胃,每天1次,0.4ml/只;荷瘤对照组:生理盐水灌胃,每天1次,0.4ml/只;CTX化疗组:接种72h后生理盐水配制成2mg/ml药液,腹腔注射30mg/kg,隔日给药。以上各组均用药至接种后第1 1天。
2.3 监测指标
观察小鼠接种前后的活动性、反应灵敏度、聚堆及毛发情况。末次给药24h后处死小鼠,小心剥离瘤块,解剖小鼠,分别用电子天平称取小鼠体重、瘤重、胸腺及肝、脾重量。
3 统计学分析
采用SPSS13.0对数据进行统计分析,数据以均数±标准差( ±s)表示,组间比较用单因素方差分析,P<0.01为差异有显著统计学意义,P<0.05为差异有统计学意义。
4 结果
4.1 温通法对S 荷瘤小鼠瘤重的影响
结果显示:温通法对s 肉瘤生长有明显的抑制作用,荷瘤对照组瘤重明显大于各治疗组,与中药低剂量组有统计学意义(P<0.05),与其余各组有显著统计学意义(P<0.01),CTX组瘤重略轻于中药高剂量组,但差别不显著,无统计学意义(P>0.05)。
4.2 对免疫应答的影响
胸腺是T淋巴细胞分化成熟的中枢免疫器官,脾脏是人体最大的外周免疫器官,也是T、B淋巴细胞定居和接受抗原刺激后产生免疫应答的重要场所,它们与机体的细胞免疫和体液免疫密切相关。免疫器官重量是反映机体非特异性免疫功能的重要指标H 。实验结果显示:荷瘤对照组的胸腺指数明显高于中药高剂量组,有统计学意义(P <0.05);荷瘤对照组的脾指数明显高于中药中剂量组、中药高剂量组,与中药高剂量组比较,有显著统计学意义(P<0.01),与中药中剂量组比较有统计学意义(P<0.05)。
4.3 各组小鼠一般状况比较
荷瘤对照组:动物活动少,反应迟缓,喜聚堆,毛发疏松无光泽,饮食少。CTX化疗组:动物活动少,反应迟缓,被毛较疏松欠光泽,饮食量减少。中药低剂量组:动物活动较少,反应较迟缓,喜聚堆,被毛较疏松欠光泽,饮食量好于CTX及荷瘤对照组。中药中剂量组:动物活动可,反应欠灵敏,被毛柔顺,饮食量好于CTX及荷瘤对照组。中药高剂量组:动物较活泼,反应灵敏,被毛柔顺有光泽,饮食好于其他各组。
5 讨论
综合古代、近代及现代医家所述,恶性肿瘤的发生是由于人体正气不足,阴阳气血失调,脏腑经络的功能障碍,致使机体的抗病能力低下,邪气乘虚而入,气、血、痰、毒等病邪互结于体内,日久成积而发瘕瘕积聚。《素问·四气调神大论篇第二》载:“阳强不能密,阴气乃绝,阴平阳秘,精神乃治,阴阳离决,精气乃绝。”此论认为疾病的根本病理改变是阴阳之气的失调所致,积是机体阳气亏虚的结果。阳气是机体呈弥散状态的营养物质,是保证生理活动的动力之源,一旦不足,则不仅易致寒邪侵袭、留滞,而且易致因脏腑功能减弱,出现病理产物,从而引起肿瘤的发生。
通过本实验结果分析,温通法不但可以直接抑制肿瘤的生长,而且通过影响免疫器官,提高机体免疫力,从而达到抑瘤作用。CTX组与中药组小鼠的抑瘤效果相当,但中药组生存质量明显高于CTX组小鼠及荷瘤对照组小鼠,小鼠的精神状态、活动能力、毛发情况等均好于CTX组和荷瘤对照组,提示中药组在提高小鼠机体免疫力方面是化疗药物不可比拟的,显示了其独特的优势,从而为其在临床上应用提供了新的思路和理论依据。温阳法对小鼠免疫机能的影响和其抑瘤作用关系,尚需要进一步的研究来验证,同时,对于其抑瘤有效成分也有待于深入研究。
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参考文献
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