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八味沉香散水提液对急性心肌缺血大鼠心电图及血清酶的影响
【摘要】 目的观察八味沉香散水提液对急性心肌缺血大鼠心电图及血清酶的影响。方法采用大鼠舌下静脉注射垂体后叶素复制急性心肌缺血模型 ,观察八味沉香散水提液对大鼠注射垂体后叶素后不同时间点心电图Ⅱ导联 T波、J点变化情况及其对血清乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶 （CK）活性的影响。结果八味沉香散水提液能明显改善垂体后叶素引起的心电图J点位移和T波变化 ,降低大鼠血清 CK和LDH水平。结论八味沉香散水提液对垂体后叶素所致大鼠急性心肌缺血具有一定的保护作用。
【关键词】 八味沉香散；心肌缺血；垂体后叶素
缺血性心脏病是心血管内科最常见的疾病，在我国随着人民生活水平的提高，冠心病的发病率呈逐年增高趋势，成为死亡的重要原因之一。传统治疗缺血性心脏病的民族药逐渐得到人们的重视。八味沉香散是由沉香、肉豆蔻、广酸枣、白芸香、木棉花等8味藏药组成，具有消心热、宁心安神、醒脑开窍之功效，是藏医临床治疗各种急慢性心脑血管系统疾病常用的药物［1］。本实验通过舌下静脉注射垂体后叶素诱发大鼠急性心肌缺血模型来观察八味沉香散对心肌缺血模型大鼠心电图和血清酶的影响，探讨八味沉香散抗心肌缺血损伤作用，为临床用药提供实验依据。
1 材料与仪器
1.1 药物八味沉香散水提液，称取沉香100 g，肉豆蔻100 g，广枣100 g，诃子100 g，白芸香50 g，木香175 g，木棉花75 g，天竺黄50 g（均购于青海金诃藏药药业股份有限公司）敲碎混和，加水回流提取3次，合并3次滤液，浓缩到40%浓度的八味沉香散水提液备用；复方丹参片（陕西天洋制药有限责任公司，0.25g/片，批号：Z20063272）。
1.2 动物SD大鼠，体质量200～260 g，♀♂各半，由青海省实验动物中心提供，合格证号：青医动管001号。
1.3 试剂垂体后叶素（蚌埠市宏业生化制药厂，1ml：6U，批号:070503）。
1.4 仪器Biopac Mp150多导生理记录仪(Biopac System.Inc)；750型全自动生化分析仪(日本东芝)。
2 方法
2.1 动物分组大鼠50只，随机分为5组，每组10只，分别为正常对照组，模型对照组，阳性对照组（复方丹参片组），八味沉香散水提液大、小剂量组。八味沉香散水提液大、小剂量组大鼠灌胃1.0 g·kg-1和0.5 g·kg-1的八味沉香散水提液；阳性对照组大鼠灌胃复方丹参片0.03 g·kg-1；正常对照组和模型对照组大鼠灌胃同体积生理盐水，各组均每天给药1次，连续10 d。
2.2 心肌缺血损伤模型的制备采用大鼠舌下静脉注射 0.8 U·kg-1的垂体后叶素复制大鼠急性心肌缺血模型。除正常对照组外，其余各组均于第10天灌胃给药后24 h舌下静脉注射垂体后叶素0.8 U·kg-1。
2.3 大鼠心电图测定全部动物于末次灌胃给药后24 h，用乌拉坦1.0 g·kg-1腹腔注射麻醉。仰卧固定于手术台上，将针状电极插入四肢皮下，连接Biopac Mp150多导生理记录仪，稳定5 min后记录正常Ⅱ导联心电图。大鼠舌下静脉注射垂体后叶素0.8 U·kg-1，并于 5 s内注射完毕。记录注射垂体后叶素后5 s，15 s ，30 s，1 min ，3 min ，5 min Ⅱ导联心电图，观察 ST段和T波的变化情况。
由于大鼠 ST段不明显 ,本实验对心肌缺血程度的观察指标主要定为 J点位移和T波的变化。J点位移和 T波高度测量以 P-R段为基线 ,每时间点测5个连续波形 ,取其平均值。记录并计算 J点位移和T波的变化值（△J=注射垂体后叶素后各时间点J点值-注射前J点值；△T=注射垂体后叶素后各时间点T波值-注射前T波值），无论升高或降低,取变化的绝对值。
2.4 血清乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶（CK）活性测定注射垂体后叶素后45 min，心脏取血约1 ml，3 000 r/min，离心15 min制备血清，送青海省二医院检验科测定血清乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶（CK）活性。
2.5 统计学处理
采用SPSS12.0 for windows软件完成，计量资料组间比较，用方差分析和LSD-t检验，实验结果用±s表示，P<0.05认为有统计学意义。
3 结果
3.1 八味沉香散水提液对垂体后叶素引起的心肌缺血大鼠心电图ST段的影响各组大鼠注射垂体后叶素后，均出现J点位移，15 s后逐渐恢复，5 min时仍未恢复到注射垂体后叶素前的水平。模型对照组各时间点J点的变化值明显高于正常对照组；复方丹参片组、八味沉香散水提液大、小剂量组各时间点J点的变化值则明显低于模型对照组。结果见表1。表1 八味沉香散水提液对垂体后叶素引起的心肌缺血大鼠心电图ST段影响（略）
3.2 八味沉香散水提液对垂体后叶素引起的心肌缺血大鼠心电图T波影响模型对照组大鼠各时间点T波的变化值明显高于正常对照组。复方丹参片组、八味沉香散水提液大、小剂量组各时间点T波的变化值则明显低于模型对照组。结果见表2。表2 八味沉香散水提液对垂体后叶素引起的心肌缺血大鼠心电图T波影响（略）
3.3 八味沉香散水提液对垂体后叶素引起的心肌缺血大鼠血清CK和LDH影响模型对照组大鼠血清LDH和CK活性明显高于正常对照组，复方丹参片组，八味沉香散水提液大、小剂量组LDH和CK活性均明显低于模型对照组。结果详见表3。表3 八味沉香散水提液对垂体后叶素引起的心肌缺血大鼠血清CK和LDH影响（略）
4 讨论
本研究采用了大剂量舌下静脉注射垂体后叶素引起大鼠的心肌缺血性损伤模型，观察了八味沉香散水提液对实验性心肌缺血损伤的保护作用。垂体后叶素是从动物垂体中提取的, 内含加压素能明显收缩冠状动脉、毛细血管、小动脉、小静脉等［2］。给大鼠舌下静脉注射垂体后叶素后，使冠状动脉收缩，造成心肌供血不足，并能收缩全身小血管，导致心脏负荷加重，在心电图上可见一系列心肌缺血的改变，表现为ST段改变、T波升高、心律失常等。利用垂体后叶素复制心肌缺血模型方法简单，快捷有效。是评价心肌保护药常用的心肌缺血损伤模型之一［3，4］。
心肌缺血缺氧时，引起高能磷酸化合物耗竭，使依赖能量的离子泵功能受损，导致线粒体钙超载，并通过不同的信号传导途径产生大量毒性氧自由基，破坏线粒体膜和心肌细胞膜的完整性。心肌细胞膜的通透性增加，导致细胞内酶CK与LDH大量释放。因此血液中心肌酶LDH，CK的活性可反映心肌缺血损伤的程度［5，6］。
本实验结果发现, 模型对照组大鼠心电图J点位移、T波变化、血清中LDH和 CK活性明显高于正常对照组，说明舌下静脉注射垂体后叶素0.8 U·kg-1制备的大鼠急性心肌缺血模型成功。复方丹参片及八味沉香散水提液能明显改善垂体后叶素致急性心肌缺血大鼠心电图T波和ST段变化，降低垂体后叶素致急性心肌缺血大鼠血清酶LDH和CK活性的升高，提示八味沉香散水提液对垂体后叶素所致大鼠急性心肌缺血具有一定的保护作用,为临床用药提供了理论依据。
【参考文献】
［1］青海省卫生厅.青海藏药标准［S］.1992：118.
［2］周 琼，陆大祥，付咏梅，等. 甘氨酸对小鼠心肌缺血损伤的防治作用研究［J］. 中国药理生理杂志，2002， 18 (4) : 12.
［3］徐叔云. 药理实验方法学，第3版 ［M］. 北京:人民卫生出版社，2003: 1009.
［4］Vincelette J, Pagila R, Kawai K, et al.Inhibition of Rho-Kinase by Hydroxyfasudil Prevents Vasopressin-Induced Myocardial Ischemia in Donryu Rats by Attenuating Coronary Vasoconstriction ［J］. Pharmacology,2005,75:145.
［5］高润霖. 急性心肌梗死诊断和治疗指南［J］. 中华心血管病杂志，2001，29 (12) :710.
［6］黄海霞，莫晓燕.中药对心肌细胞的保护作用［J］.中草药，2003，34（12）：1150.
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