- 相关推荐
健儿厌食康颗粒质量标准研究
摘要】目的 建立健儿厌食康颗粒质量标准。方法 对麦芽、山药、莲子进行定性鉴别。对颗粒剂中粒度、水分、溶化性、装量差异进行检查，采用薄层扫描法测定颗粒剂中熊果酸含量。结果 熊果酸点样量在0.66～3.30g范围内线性关系良好。同板精密度为1.3%异板精密度为2.6%。平均回收率为96.5% (RDS为1.6%)。结论 方法简便可靠，可用于健儿厌食康颗粒的质量控制。
【关键词】熊果酸 薄层扫描法 质量控制
健儿厌食康颗粒具有补脾益气、消食健胃、增进乳食之功效，主治脾胃气虚型小儿厌食症。主要由山药、鸡内金、莲子、山楂、六神曲、麦芽等10味中药组成的制剂，临床应用四十余年，组方合理，疗效确切，本文对健儿厌食康颗粒质量控制方法进行了研究，建立了质量标准，为本品新药研发提供质量控制方法。
1 仪器与试药
CS- 930型双波长薄层扫描仪(日本岛津);健儿厌食康颗粒(辽宁中医学院，批号021201、021202、021203、030301、030302);熊果酸对照品(中国药品生物制品检定所，批号742-9405，含量为99.7%);麦芽、山药、莲子(购自沈阳天益堂大药房)硅胶G(青岛海洋化工厂 200-300目);羧甲基纤维素钠(沈阳试剂厂);氯仿、丙酮、无水乙醇等均为分析纯
2 方法与结果
2.1 性状：本品为颗粒剂，为黄棕色至棕色颗粒，味微苦。
2.2 鉴别
2.2.1 麦芽
取本品，置显微镜下观察：稃片外表皮细胞黄色或淡黄色，纵列，常由一个长细胞与两个细胞相间排列;长细胞壁较厚，波状弯曲，木化;短细胞一大一小，大者内含棕色物;可见单细胞或其脱落痕。
2.2.2 山药
取本品10克，加无水乙醇30ml,回流提取1小时，滤过，滤液浓缩至2ml，加盐酸0.5ml，加水20ml,置水浴上蒸干，放冷，残渣加乙醚20ml溶解，滤过，滤液挥尽乙醚，残渣加无水乙醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取山药粉末1g同法制成对照药材溶液。吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-丙酮(10：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%香草醛硫酸溶液，在105℃烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.2.3 莲子
取本品5g，加70%乙醇30ml，冷浸4小时，滤过，滤液作为供试品溶液。另取莲子对照药材0.1g，加70%乙醇1ml，冷浸4小时，滤过，滤液作为对照药溶液。吸取上述两种溶液各 4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-醋酸-水(4：0.5：4)上层液为展开剂，展开两次，取出晾干，喷以α-萘酚试液，于105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
2.3 检查
2.3.1 粒度：取本品5批，照《中国药典》(2005年版二部附录IN颗粒剂项下的“粒度”检查。[1]结果表明，本品不能通过一号筛和能通过五号筛的总和未超过供试量的15%，符合中国药典有关规定。
2.3.2 水分：取本品3g，照水分测定法第一法(《中国药典》2000年二部附录Ⅷ M)测定颗粒剂的含水量，[2]结果表明，本品5批含水量均不大于5%，符合中国药典有关规定。
2.3.3 溶化性：取本品5批，照《中国药典》(2005年版二部附录IN颗粒剂项下的“溶化性”检查。结果表明，本品能够混悬均匀，并未见有焦屑等异物。符合中国药典有关规定。
2.3.4 装量差异：取本品5批，每批10袋，照《中国药典》(2005年版二部附录IN颗粒剂项下的“装量差异”方法检查，结果表明，本品装量差异均在±7%以内，符合中国药典有关规定。
2.4 薄层扫描法测定健儿厌食康颗粒山楂中的熊果酸含量
2.4.1 色谱条件
薄层板：取含0.2%羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板，厚度0.3mm，室温阴干，105℃活化30分钟;展开剂：氯仿-丙酮-冰醋酸(18：2：0.2);展开方式：上行展开，展距12cm;显色剂：10%硫酸无水乙醇溶液，显色后105℃烘约5-10分钟;薄层扫描测定参数：λS=520nm，λR=700nm，SX=3反射式锯齿扫描。
2.4.2 溶液的制备
2.4.2.1 熊果酸对照品溶液的制备：
精密称取熊果酸对照品适量，用无水乙醇配制成含熊果酸约0.6mg•mL-1的溶液，即得。
2.4.2.2 样品溶液的制备：
取本品5g，精密称定，置索氏提取器中，加乙醚适量，加热回流提取4小时，提取液回收乙醚至干，残渣加无水乙醇溶解，定量转移至5ml量瓶内，并稀释至刻度，摇匀，即得。
2.4.2.3 阴性对照液的制备：
取山药(炒)、鸡内金(炒)、大枣、六神曲(炒)各1.5g，薏苡仁(炒)、莲子、茯苓、麦芽(炒)、莱菔子(炒)各1g，置索氏提取器中，加乙醚适量，加热回流提取4小时，提取液回收乙醚至干，残渣加无水乙醇溶解，定量转移至5ml量瓶内，并稀释至刻度，摇匀，即得。
2.4.3 阴性干扰试验
精密吸取对照品溶液2uL与4uL，供试品与阴性液各6uL，点样于同一硅胶G薄层板上，按2.4.1项下色谱条件展开，晾干，显色测定，绘制薄层光谱图。结果表明，对照品与供试品，可见光区内吸收峰峰形、峰位完全相同，且在520nm波长处有最大吸收，阴性液在此波长下无干扰。在与对照品色谱相应位置处，供试品具有相同位置的色谱峰，阴性液在此峰位无吸收。
2.4.4 标准曲线绘制
精密称取熊果酸对照品3.3mg，置5ml量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0uL，点样于同一硅胶G薄层板上，按2.4.1项下色谱条件测定，以进样量(ug)为横坐标，以色谱峰面积(A)为纵坐标，绘制标准曲线，经回归处理，得回归方程为 Y=19606.4x-2771.8(r=0.9990)，表明熊果酸点样量在0.66～3.30g范围内线性关系良好。
2.4.5 精密度试验
取样品5g，精密称定，按2.4.2.2项下方法制备供试品溶液。
2.4.5.1 同板精密度试验
精密吸取同一供试品溶液6uL，在同一硅胶G薄层板上，重复点样6次，按2.4.1项下色谱条件展开，测定，结果表明同板精密度为1.3%。
2.4.5.2 异板精密度试验
精密吸取供试品溶液6uL、对照品溶液(0.4mg•mL-1)2uL与4uL，分别点予6块硅胶G薄层板上，按 2.4.1项下色谱条件展开，测定，结果表明异板精密度为2.6%。
2.4.6 稳定性试验
取样品5g(批号：021201)，精密称定，按2.4.2.2项下方法制备供试品溶液。将供试品溶液分别间隔不同时间测定，结果见表1。结果表明，供试品溶液在2小时内测定，熊果酸含量无变化。
Table 1 Result of stability test
2.4.7 重复性试验
取样品(批号为021201)6份，分别照2.4.2.2项下方法制备供试品溶液，按2.4.1项下色谱条件展开，测定，结果见表2。
Table 2 result of repeating experiment 2.4.8 加样回收率试验
精密称取已知准确含量的样品(批号021201)5g，加入浓度为0.6mg•mL-1的对照品溶液2.0ml，按 2.4.2.2项下方法制备供试品溶液，按2.4.1项下色谱条件展开，测定，结果表明平均回收率为 96.5%，RDS为1.6%。
2.4.9 含量测定
2.4.9.1 提取方法
根据待测组分熊果酸易溶于乙醚性质，以乙醚为溶剂，分别采用直接回流提取法，索氏提取法、超声提取法提取，结果见表3。根据测定结果，确立以索氏提取4小时为最佳提取方法。
Table 3 result of observing the pick-up method
2.4.9.2 样品测定
取样品10批，照2.4.2项下方法制备供试品溶液和对照品溶液。吸取供试品溶液5μl，对照品溶液3μl与6μl，分别交叉点于同一含0.2%羧甲基纤维素钠溶液为粘合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-丙酮-冰醋酸(18：2：0.2ml)为展开剂，置用展开剂饱和20分钟的层析缸内，展开，展距12cm，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在110℃烘至斑点显色清晰取出，在薄层板覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，进行薄层扫描，波长：λS=520nm，λR=700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算熊果酸含量，结果见表4。
Table 4 result of determining the content of ursolicocid (n=3)
3 讨论
熊果酸为山楂中有机酸成分之一，经参考有关文献，拟以薄层扫描法测定本制剂中熊果酸含量，经反复筛选溶剂系统，在现行色谱条件下，熊果酸与其他组分分离很好，阴性液无干扰，方法回收率为96.5%，方法学考察结果表明，精密度，稳定性、重现性均良好，可作为键儿厌食康颗粒剂中熊果酸含量测定方法。
参 考 文 献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[Z].北京:化学工业出版社,2005:22.
[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典[Z].北京:化学工业出版社，2005:193.
[3]卫生部药政局. 新药(中药)研究指南[S].北京:中国医药科技出版社,1993.
[4]江苏新医学院.中药大辞典[M].上海:上海科技出版社,1977:170.
[5]曹春林.中药药剂学[M].上海:上海科学技术出版社,1986:217-227.
【健儿厌食康颗粒质量标准研究】相关文章：
天苍颗粒质量标准研究03-07
对健脾增食颗粒治疗小儿厌食症的临床研究03-18
萎胃康颗粒剂治疗慢性萎缩性胃炎实验研究03-04
中药消导饮颗粒治疗小儿厌食症的体会03-06
首乌愈瘫片质量标准研究03-29
对香连素片质量标准的研究03-19
喉疾灵口含片质量标准研究01-18
研究妇洁颗粒的体外、体内抗菌活性03-19