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浅谈广东标准与中国药典陈皮炮制品中橙皮苷含量的比较
【摘要】 目的 以橙皮苷为指标比较广东标准陈皮炮制品与药典标准炮制的陈皮的质量差异。方法 高效液相色谱法，色谱条件：Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)为色谱柱，流动相为甲醇?水(体积比40∶60)，流速为1.0 mL/min，柱温为25 ℃，检测波长为284.1 nm，进样量为10 μL。结果 广东标准陈皮炮制品中的橙皮苷含量平均值为4.276%，药典标准炮制陈皮的橙皮苷含量平均值为4.257%，两种方法差异无显着性意义。结论 广东标准陈皮炮制品的质量与药典标准炮制品水平持平。
【关键词】 陈皮;橙皮苷;广东标准;国家标准;高效液相色谱法
Abstract:Objective To compare the quality of Citrus reticulata Blanco processed according to Guangdong standard and Chinese Pharmacopeia based on the content of hesperidin.Method Hesperidin in Citrus reticulata Blanco processed from the two standards was analyzed on a Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)column using methanol?water(40∶60) as mobile phase. The flow rate was 1.0 mL/min and detection wavelength 284 nm. Result The average content of hesperidin in Citrus reticulata Blanco processed by Guangdong standard was 4.276%, and that by Chinese Pharmacopeia was 4.257%, while no significant difference was noted in respect of the content between the two processings. Conclusion Similar qualities of Citrus reticulata Blanco are obtained from the two processings.
Key words:Citrus reticulata Blanco; hesperidin; HPLC
陈皮为芸香科植物橘(Citrus reticulata Blanco)及其栽培变种的干燥成熟果皮，味苦、辛，性温，可理气健脾、燥湿化痰，用于胸脘胀满、食少吐泻、咳嗽痰多[1]。主产于广东、福建、四川、江苏、浙江、江西、湖南等地[2]。橙皮苷是陈皮中含量较高的一种双氢黄酮氧苷物质，早期作为维生素P，具有增强毛细血管壁作用，现代研究表明其具有降低血压、抗过敏、降低低密度胆固醇、影响血压、改变体内酶活性、改善微循环、抗菌、抗肝炎、抗氧化、抗肿瘤、抗癌等生理功能，具有很高的药用价值[3]。
陈皮有多种炮制方法，不同的药品标准收载的方法也不相同，《中国药典》2005版规定陈皮的炮制方法为除去杂质，喷淋水，润透，切丝，阴干[1]。《广东省中药炮制规范》1984版中陈皮炮制方法与药典方法不同，主要用蒸制。为了比较广东地方标准和国家标准陈皮的质量差异，探讨饮片质量标准，本文采用高效液相色谱法对10个样品的陈皮中橙皮苷进行含量测定，为广东地区饮片生产的规范化和陈皮炮制工艺的合理性提供理论依据。
1仪器与试药
Waters高效液相色谱仪(四元泵，二极管阵列检测器，自动进样)，DK?S26型电热恒温水浴锅(上海精宏实验设备有限公司)，RE?52?98旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)，SHZ?D(Ⅲ)循环水式真空泵(巩义市英峪予华仪器厂)。
橙皮苷对照品(批号721-9202，中国药品生物制品检定所)，石油醚(60～90℃)为分析纯，甲醇有化学纯和色谱纯，水为二级水。10个陈皮药材样品的购入地见表2。
2方法与结果 1色谱条件
色谱柱：Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm，5 μm);流动相：甲醇?水(体积比40∶60);流速：1.0 mL/min;柱温：25 ℃;检测波长：284.1 nm;进样量：10 μL。色谱图见图1。 2对照品溶液的制备
精密称取橙皮苷对照品0.00373 g，以甲醇溶解并定容至5 mL，摇匀，过微孔滤膜，即得对照品溶液(0.746 mg/mL)。 3供试品溶液的制备
将各陈皮样品粉碎，置50 ℃烘干30 min，取出置干燥器内备用。
精密称取各样品1 g，加甲醇100 mL，回流提取2次，每次2 h，滤过，合并滤液，减压浓缩，甲醇定容至100 mL，摇匀，过微孔滤膜，即得供试品溶液。 4检测波长的确定
紫外扫描样品溶液显示其最大吸收在284.1 nm处，因此以此波长为检测波长进行含量测定。 5线性关系考察
按“2.1”项下色谱条件，分别吸取对照品溶液2、4、5、6、8、10 μL进样测定，记录峰面积。以峰面积(A)为纵坐标，进样量(m)为横坐标绘制标准曲线并计算得回归方程为A=2 267 200m-396 288，r=0.999 7，线性范围是1.492～7.460 μg。
图1HPLC色谱图 略 6稳定性试验
在同样的色谱条件下，将同一供试品溶液在0、2、4、8、12、24 h各进样1次测定，测得峰面积的RSD=1.99%，说明样品溶液在24 h内稳定。 7精密度试验
将同一供试品溶液按“2.1”项下条件重复进样6次，分别测定峰面积，结果得RSD=2.02%。 8重复性试验
精密称取同种样品5份，按“2.3”项下方法制备，并按“2.1”项下色谱条件平行测定5次，计算含量，结果得RSD=3.05%。
2.9加样回收试验
采用加样回收法，精密称取已知橙皮苷含量的样品5适量，分别精密加入一定量的橙皮苷对照品，按“2.3”项方法制备，并按“2.1”项色谱条件进行测定，平行做5份，结果见表1。
表1橙皮苷回收率试验结果 略 10样品含量测定
将10份供试品溶液分别按“2.1”项下的色谱条件进样，记录色谱峰面积，根据标准曲线计算橙皮苷在药材中的含量，结果见表2。将广东本省炮制的药材与药典法炮制的药材进行橙皮苷含量的比较，结果见表3，从表3结果可看出，两种方法结果比较差异无显着性(P0.05)。
表210种陈皮样品中橙皮苷的含量 略
表3两种炮制方法橙皮苷含量的比较 略
3讨 论 1本实验考察了药典提取方法，即用石油醚索氏提取3 h脱脂后再用甲醇提取，高效液相谱图显示在橙皮苷的峰附近没有杂峰干扰;再改用甲醇直接提取，高效液相的谱图变化不大，橙皮苷的峰附近也没有杂峰干扰，并且该峰面积增加。因此最后确定用甲醇直接提取。 2根据文献[3-5]记载，流动相大多数采用甲醇?水洗脱系统。在实验中，首先用甲醇?水(体积比45∶55)洗脱，橙皮苷约10 min出峰，但与前一个峰分离不好;更换为甲醇?水(体积比35∶65)洗脱，峰的分离很好，但是橙皮苷在约45 min出峰，时间太长，影响实验进度;调整为甲醇?水(体积比40∶60)，峰分离度好，出峰时间约20 min，时间合适，故流动相确定为甲醇?水(体积比40∶60)。 3HPLC法测定中，按《中国药典》2005版标准生产的陈皮中橙皮苷的含量以秦皇岛唐人医药店的样品含量最高，秦皇岛艾欣超市的样品最低。广东的5个样品虽然按地方标准炮制规范生产，但与其他样品在含量上并未有较大区别;而在5个样品之间却有差异，最高为5.500%，最低为3.473%，由此反映出饮片内在质量的不同。《中国药典》2005版对陈皮中橙皮苷的含量做出不得少于3.5%的规定，本次10个样品中，除了2个样品橙皮苷的含量略低之外，其他样品都符合要求。
4结 论
广东标准陈皮炮制品与国家标准陈皮炮制品的橙皮苷含量没有统计学差异，故就整体而言，广东标准陈皮炮制品的质量符合国家标准。
【参考文献】
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部[S].北京：化学工业出版社,2005:136.
[2] 张志海，王彩云，杨天鸣，等.陈皮的化学成分及药理作用研究进展[J].西北药学杂志,2005,20(1):47-48.
[3] 李红，赵征，汪满情.橙皮苷提取工艺条件的研究[J].食品研究与开发,2003,24(2):29-31.
[4] 张莉.高效液相色谱法测定三蛇胆陈皮末中橙皮苷的含量[J].广东药学院学报，2002，18(4)：275-276.
[5] 运委，张建苹.高效液相色谱法测定蛇胆陈皮散中橙皮苷的含量[J].时珍国医国药，2006(5)：60-61.
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