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TLR2和TLR4与慢性心功能不全患者免疫球蛋白的相关性研究
摘要：目的 对72例慢性心功能不全患者进行外周血单核细胞Toll样受体2和4的表达变化与患者体内免疫球蛋白指标变化的相关性研究并将所研究的结果外推至人群性的疾病研究。方法 选取我院的心内科接受治疗的72例心功能不全患者进行回顾性的资料分析，同时选取35名健康人作为对照组。使用流式细胞技术和德国BN-Ⅱ全自动特种蛋白分析仪检查TLR2、TLR4及免疫球蛋白相关指标，探究其相关性。结果 TLR4阳性在外周血单核细胞中表达轻微组和严重组较对照组相比差异显著(P<0.05)，TLR2阳性在外周血单核细胞中的表达与IgA和IgG具有正相关(P<0.05)，TLR4阳性在外周血单核细胞中的表达与IgA具有正相关(P<0.05)。结论 TLR2和TLR4与慢性心功能不全患者免疫球蛋白具有相关性。
关键词：TLR2;TLR4;慢性心功能不全;免疫球蛋白
Toll样受体(TLRs)是一种识别受体，也是机体在自身与身具有一种保守模式的受体，在天然免疫中具有举足轻重的作用。TLR2和TLR4是该受体家族中具有一定代表性的受体，它们与机体的发生的炎症以及免疫功能具有一定的联系[1]。研究并分析TLR2和TLR4在慢性心功能不全患病人群外周血中CD14+单核细胞中的表达，以及该类受体与患者体内免疫球蛋白相关指标的相关性 [2]。并为深入阐明TLR2和TLR4在慢性心功能不全的发生、发展的作用提供新的理论基础。
1资料与方法
1.1一般资料 选取自2013年1月20日～2014年10月20日来我院的心内科接受治疗的慢性心功能不全患者72例进行回顾性的资料分析，所有患者均经过Framingham标准进行判定，并且应用NTHA进行分级。将1～2级患者分入轻微组，3～4级患者分入严重组，同时选取35名健康人作为对照组。其中轻微组患者29例，男性患者18例，女性患者11例，年龄38～82岁，平均是(58.4±10.5)岁，严重组患者43例，男性患者23例，女性患者20例，年龄36～85岁，平均是(59.2±11.6)岁，对照组30例，男性17例，女性13例，年龄39～79岁，平均是(56.4±10.3)岁。三组患者一般资料无明显差异，具有可比性。
1.2方法
1.2.1流式细胞染色及受体分析先对慢性心功能不全患者和正常人进行静脉取血，而后对其进行染色，进而使用离心机进行离心5min，弃上清液。采用美国COULTER EPICSALTRA流式细胞仪检测样品。样品的分析使用cellquest软件，分析TLR2和TLR4在外周血CD4+单核细胞表达的百分率，以及平均荧光强度。
1.2.2免疫球蛋白相关指标检测先对慢性心功能不全患者和正常人进行空腹静脉取血，采用德国BN-Ⅱ全自动特种蛋白分析仪检测，应用速率散射比浊法检测蛋白中IgA、IgG以及IgM的水平。
1.3统计学方法 采用SPSS18.0统计软件对本次研究所取得的数据进行分析，计数资料采用χ2检验，计量资料采取t检验，以(x±s)的形式对数据进行表示，以P<0.05代表有统计学意义。
2结果
2.1三组TLR2和TLR4在外周血单核细胞表面表达水平对比TLR4+在轻微组和严重组患者测得的外周血的CD14+单核细胞表面的值差别显而易见(P<0.05)，并且轻微组和严重组的差别也显而易见(P<0.05)。
2.2TLR2、TLR4的表达与免疫球蛋白相关指标的相关性经过资料取证以及统计学分析可知，TLR2阳性在外周血单核细胞中的表达与IgA具有正相关(r=0.245，P<0.05)，TLR2阳性在外周血单核细胞中的表达与IgG具有正相关(r=0.346，P<0.05)，TLR4阳性在外周血单核细胞中的表达与lgA具有正相关(r=0.314，P<0.05)。
3讨论
TLR2和TLR4的种类为跨膜受体蛋白，它们的结构由三种成分组成。相对TLR4而言，TLR2的识别能力较强，它可以识别革兰阳性菌，也可识别该类细菌的细胞壁的固有成分肽聚糖。而TLR4只可以识别革兰阴性菌固有的成分脂多糖[3，4]。依据近期的相关调查研究发现，这两种跨膜受体蛋白可以导致炎性组织损伤，并且TLR4还与肿瘤的发生密切相关[5]。相对Toll样受体家族中其它亚类而言，这两种蛋白最具有代表性，它们几近在人体所有细胞系中表达，在淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞等中均由它们的表达[6]。并且在心肌细胞、消化道上皮细胞中也有分布。
本次研究对72例慢性心功能不全患者和35例健康人进行相关性研究并将研究的结果外推至人群性的疾病研究。用流式细胞技术检测72例慢性心功能不全患者外周血单核细胞中TLR2和TLR4的表达差异，研究结果表明，TLR2+在三组患者测得的外周血的CD14+单核细胞表面的值无差别(P>0.05)，而TLR4+在严重组中的表达明显高于轻微组(P<0.05)，并且，严重组和轻微组中的表达均明显高于对照组(P<0.05)。同时也进一步证实TLR4在外周血单核细胞中的高度表达与慢性心功能不全的发生有一定的关联性。同时经德国BN-Ⅱ全自动特种蛋白分析仪的检测结果表明，TLR2阳性在外周血单核细胞中的表达与IgA和IgG具有正相关(P<0.05)，TLR4阳性在外周血单核细胞中的表达与IgA具有正相关(P<0.05)。综上所述，慢性心功能不全患者体内TLR2和TLR4的表达与免疫球蛋白的相关指标具有一定的联系，其中TLR2与IgA和IgG呈正向线性相关，随着TLR2的表达增强，IgA和IgG含量增加。TLR4与IgA呈正向线性相关，随着TLR4的表达增强，IgA含量增加。
参考文献：
[1]肝硬化患者外周血单核细胞表面TLR4和TLR2表达的临床意义[J].世界华人消化杂志，2006，14(34)：234-235.
[2]金伯泉.细胞核分子免疫学实验技术[M].第四军医大学出版社，2002：78-81.
[3]郭燕，李侠，周华兰，等.老年慢性左心衰严重程度与循环激酶插入结构阈受体阳性细胞水平变化的关系[J].现代中西医结合杂志，2011，20(29)：3644-2645.
[4]郭燕，李侠，杨海晨.TOll样受体2和4在老年慢性左心力衰竭中的表达[J].中国临床标间杂志，2012，15(04)：412-413.
[5]王妍，陶军，涂昌，等.高血压患者循环内皮细胞微颗粒水平的变化[J].中华老年心脑血管病杂志，2006，8(04)：222-223.
[6]李侠，郭燕，胡有东，等.循环内皮细胞微颗粒和高敏C反应水平变化与慢性左心衰严重程度的相关性研究[J].中华老年医学杂志，2011，30(06)：472-473.
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