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侵袭性真菌感染标本采集
标本的采集、接收与保存是真菌检验的一个重要环节,合格的标本是保证检验结果正确性的重要条件。下面是yjbys小编为大家带来的侵袭性真菌感染标本采集的知识,欢迎阅读。
概况
标本的采集、接收与保存是真菌检验的一个重要环节,合格的标本是保证检验结果正确性的重要条件。
适合于深部真菌检验的各类标本包括血及骨髓液、各种体液、脑脊液、痰、支气管肺泡灌洗液、支气管毛刷、肺穿刺物、组织活检标本、尿、粪、脓、尿道及阴道分泌物、咽拭子等。
标本采集部位消毒
一步法:葡萄糖酸氯己啶作用30s,或70%异丙醇消毒后自然干燥。
三步法:
(1) 70%乙醇,待干30s以上
(2) 1%2%碘酊(直径达75px以上),作用30 s或10 %碘伏60 s
(3) 70 %乙醇脱碘:对碘过敏的患者,用70%乙醇消毒60s
标本的采集与处理-血液
推荐在抗真菌药物使用前,发热初期或寒战期取静脉血或骨髓液。
采集血液后立即注入血培养瓶内并轻轻摇匀。
至少采集2套。标本与培养基比例为1/101/5(必须包括需氧瓶或真菌专用瓶,成人每瓶810ml)。
标本的采集与处理-血液
2小时内常温送检。若不能及时送检,则常温保存。
评估导管相关性血流感染(CRBSI):
患者已拔管-采集2套外周血培养,同时做导管尖Maki法半定量培养(导管尖长度125px),如1套及以上阳性,导管尖培养阳性(≥15 CFU),且培养菌种相同,即为CRBSI。
患者尚未拔管-至少采集1套外周血培养,同时采集等量的导管血进行培养,如导管血与外周血均阳性,即为CRBSI;如导管血培养阴性,外周血培养阳性且为念珠菌属,且没有其它明确感染源,也可能为CRBSI。
标本的采集与处理-骨髓
标本采集:使用肝素化的注射器或溶解离心管采集骨髓液0.5ml(儿童)至3ml(成人)后送检。
标本处理:15分钟内常温送检。若不能及时送检,则常温保存。不建议常规做骨髓液培养,如需培养可将骨髓液接种于培养瓶,但易出现假阳性。骨髓液 需同时做吉姆萨染色镜检。
标本的采集与处理-静脉导管
标本采集:剪取导管尖段125px置于无菌容器中送检。
标本处理:15分钟内常温送检。若不能及时送检,则4℃保存。将导管置于血平板上,使用无菌镊子将其从平板一端滚动至另一端,滚动4次,做导管尖Maki法半定量培养。不要使用含放线菌酮的培养基。
标本的采集与处理-脑脊液,心包液,腹水和关节液
标本采集:除脑脊液外,将其余的无菌体液置于含肝素的无菌真空采血管。脑脊液使用脊髓穿刺针采集于无菌试管中送检。
标本处理:
15分钟内常温送检。若不能及时送检,则常温保存(不能冷藏)。标本大于2ml,则2000g离心10分钟,取沉渣接种。
若标本量少于2ml,则将标本直接接种于培养基。
推荐使用细胞离心机对无菌体液进行涂片镜检。脑脊液也可直接接种于血培养瓶。
标本的采集与处理-脓液、引流液、创面分泌物及窦道
标本采集:
开放性创口:用无菌生理盐水冲洗创面后,应采集病灶活动性边缘组织标本。
封闭性脓肿:局部皮肤消毒后用注射器抽取脓血性液体送检。
标本处理:2小时内常温送检。将标本直接接种于培养基。较浓稠的标本需使用消化液处理。
标本的采集与处理-下呼吸道标本(深部痰液,支气管吸取物,肺泡灌洗液)
标本采集:清洁口腔后采集清晨第一口痰液。采用外科方法进行支气管毛刷取样和采集肺泡灌洗液。唾液或24小时痰液都不能用来进行真菌培养。
标本处理:2小时内室温送检;若不能及时送检,则4℃保存。将标本接种至含抗生素的选择培养基中。较黏稠的下呼吸道标本需要使用消化液处理,并2000g离心10分钟后取沉渣接种。
标本的采集与处理-眼(角膜刮片、玻璃体液等)
标本采集:一般由临床医生操作;角膜刮片,针吸玻璃体液
标本处理:15分钟内常温送检。若不能及时送检,则常温保存。角膜刮片直接接种至不含抑制剂的培养皿中,采用X或C型涂菌方式;玻璃体液离心后取沉淀物接种。
标本的采集与处理-组织标本
采集标本后用无菌容器转运,如标本量较少,应滴加几滴无菌盐水保湿。
标本处理:及时送检,或室温保存。
培养标本使用灭菌眼科剪将标本剪成米粒大小后接种;
怀疑组织胞浆菌感染应对组织进行研磨,或使用裂解离心技术进行处理,以使组织胞浆菌释放出来;
怀疑接合菌感染的组织则直接接种。
镜检组织标本需进行研磨,但这一操作会影响丝状真菌培养阳性率,组织镜检建议病理科与检验科联合检测。
组织标本最好接种到包含抗生素和血的培养基中。
标本的采集与处理-尿液
标本采集:采集早晨第一次清洁尿液、耻骨上联合穿刺尿液或导管尿液1050ml;不能采用24小时尿液。
标本处理:2小时内常温送检;若不能及时送检,则4℃保存。
尿液接种前需要2000g离心10分钟,取沉渣进行镜检和接种。
尿液真菌培养不推荐定量检测。
不合格标本
• 标本标识与申请单不符,标识错误或没有标识;
• 标本未按规定采集于无菌容器或容器选择不恰当;
• 采集标本时未按规定作消毒或清洁创口;
• 标本采集量过少;
• 标本保存方式不恰当或保存时间超过规定;
• 血培养瓶中有凝块;
• 血培养瓶破碎,损坏,渗漏或过效期;
• 血培养瓶数不够;
• 稀薄唾液或低倍镜下上皮细胞数大于10个;
• 采集尿液标本未清洁会阴部及尿道口。
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