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卫生资格《检验技士》预习资料:免疫电泳技术
免疫电泳技术原理
免疫电泳技术实质上是在直流电场作用下的凝胶扩散试验。它的原理是将凝胶扩散置于直流电场中,在一定的条件下,抗原及抗体离解成为带正电或负电的电子,在电场中向异相电荷的电极移动,所带净电荷量越多、颗粒越小,泳动速度越快,反之则慢。由于电流加速了抗原、抗体的运行速度,缩短了两者结合的时间,加快了沉淀现象的产生。当有多种带电荷的物质电泳时,由于静电荷不同,而区分成不同区带,使抗原决定簇不同的成分得以区分。
影响因素有:①电场强度;②溶液pH;③离子强度;④电渗等。
总补体溶血活性影响因素
【参考范围】比色法:60~120kU/L.
【影响因素】
1.在补体测定中标本采集与保存极为重要,即待检标本要新鲜。一般静脉取血后,置室温1h使血液凝固,分离血清后最好2h之内检测完毕,否则应尽快置-20℃保存,避免反复冻溶,以防补体活性降低。
2.补体活性不甚稳定,56℃30min、剧烈振荡、酸碱、乙醇、乙醚、肥皂、蛋白酶等均可使其灭活,因此检测所用器皿要洁净并呈中性。
3.该实验影响因素较多,操作要严格,溶血素、绵羊红细胞等配制要准确。
【临床意义】补体是存在于正常人和脊椎动物新鲜血清中的一组不耐热、经活化后具有酶活性的复杂球蛋白,统称为补体系统,目前已发现该系统包含有30多种可溶性蛋白和膜结合蛋白,其中大部分由肝脏和脾脏中的巨噬细胞合成。补体是机体重要的防御因子,广泛参与抗微生物防御反应及免疫调节,能与任何一种抗原-抗体复合物结合并被激活,产生溶解靶细胞、促进吞噬、清除免疫复合物、参与炎症反应等一系列生物活性反应,同时也可介导变态反应及自身免疫性疾病的病理损伤。
1.CH50升高常见于各种急性期反应,如急性炎症(风湿热急性期、结节性动脉炎、皮肌炎、伤寒、麻疹、黑热病、肺炎、急性心肌梗死、甲状腺炎、阻塞性黄疸)、组织损伤、恶性肿瘤特别是肝癌等可较正常高2~3倍。
2.CH50降低补体消耗增加见于血清病、链球菌感染后肾小球肾炎、SLE、冷球蛋白血症、自身免疫性溶血性贫血、类风湿性关节炎、移植排斥反应等;补体大量丧失见于肾病综合征、大面积烧伤、外伤、手术和失血过多;补体合成不足见于肝硬化、慢活肝、急性肝炎重症患者等。
3.判断补体检测结果时应注意动态观察,最好数种补体成分同时检测,以便对患者病情进行综合分析。
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